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細胞培養過程中添加劑起到的作用2017/7/13
腫瘤細胞能量來源：谷氨酰胺L－谷氨酰胺是一種氨基酸，細胞的重要能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。同時L-谷氨酰胺不穩定，在中性的水溶液中會自發降解；降解產物對細胞有毒性（對干細胞，原代細胞影響尤其...
細胞培養技術注意事項2017/7/11
1.原代細胞實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后，才開始實驗操作。每次操作...
原代細胞復蘇技術2017/7/6
1.原代細胞凍存復蘇技術簡介在ELISPOT檢測的應用中，往往需要用到凍存的淋巴細胞樣品作為檢測細胞。由于ELISPOT檢測的是細胞的免疫功能，不僅僅需要保持細胞的存活率，而且還要保證細胞的功能不發生...
細胞常見的保存方法2017/7/4
原代細胞保存溫度越低，保存時限更長；溫度越低，對細胞傷害越大；低溫也不怕，我有防凍劑（e.g.甘油）。下面的表格就是五種常見保存細菌細胞的方法和大約時限。保存條件溫度°C大約時間瓊脂平板44-6周（A...
細胞同步化實驗操作步驟2017/6/29
在腫瘤細胞培養過程中，細胞多處于不同的細胞周期時相中。不同時相的細胞對藥物干預存在不同的反應，會影響實驗的重復性，因此需要制備細胞周期一致的細胞。細胞同步化是解決該問題的好辦法。細胞同步化是利用藥物或...
細胞懸液標本制備實驗步驟2017/6/27
細胞系懸液標本制備實驗步驟(1)取材：收集對數生長期細胞于離心管中，800～1000r／min離心10min，棄上清，彈指法混勻細胞。沿管壁加入2．0％～2．5％冷戊二醛，輕輕吹打，4℃固定30min...
原代細胞培養注意事項2017/6/22
原代細胞培養：1、實驗材料要新鮮，從活體分離材料后要低溫保存，并盡快進行細胞分離實驗。2、無菌操作。操作時用的培養液，可加平時細胞培養液5倍含量的青鏈霉素。3、用酶法分離細胞時，注意酶液的濃度和控制消...
腫瘤細胞凍存保護劑2017/6/20
腫瘤細胞很多化合物都可以作為凍存保護劑，它們既可以單獨使用也可以聯合使用，例如糖、血清和去污劑。雖然凍存沒有的準則，但是大家普遍認為二甲基亞砜（DMSO）和甘油是保護活細胞和組織使用zui廣泛且zui...
人類外周血淋巴細胞的培養方法2017/6/15
實驗原理染色體是在顯微鏡下可見細胞系有絲分裂過程中出現的結構。因此，必須獲得染色體標本才能進行檢查分析，通常情況下，都是利用外周血淋巴細胞進行核型分析。正常情況下，人體外周血淋巴細胞不再分裂，但植物血...
細胞長期保存的方法2017/6/13
細胞系長期低溫冰凍必然會導致部分細胞死亡，而且很多時候我們要把細胞樣本拿來重新接種做實驗，所以解凍再凍的過程也會導致細胞死亡。那么起始樣本的細胞濃度就要達到一定的高度，這樣在以后保存的過程中就算死亡一...
原代細胞培養過程可能出現的問題及解決辦法2017/6/8
原代細胞培養過程中會出現這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞不貼壁、生長緩慢、生長不好，甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養細胞不貼壁可能原因：●胰蛋...
細胞株培養時消毒滅菌的方法2017/6/6
細胞株嚴格的消毒滅菌對保證細胞培養的成功是極為重要的，其方法分為物理法和化學法兩類。前者包括干熱、濕熱、濾過、紫外線及射線等，后者主要指使用化學消毒劑等。①熱滅菌：玻璃器皿，160~170℃，90~1...
ATCC細胞株解凍和培養操作推薦2017/6/1
凍存的ATCC細胞株和雜交腐細胞株在運送過程中使用干冰保持低溫。收到細胞后，可以立即解凍復蘇，去除二甲基亞砜（DSMO0）后進行細胞培養。如果不立即復蘇培養細胞，必須將細胞凍存管放置于液氮罐氣相層儲存...
原代細胞保存的主要方法之一細胞凍存2017/5/25
利用凍存技術將原代細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養的細胞被污染或其...
原代細胞培養基的保存方法分析2017/5/23
原代細胞培養基的保存方法分析1.干粉，買了后一定要保存在4度。有人保存在-20度我認為沒有必要。但4度是非常必要的。保證期是有提示的。2.配好的無血清培養基一定保存在4度，保存不要超過3個月。用時根據...
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